Luận án Tiến sĩ Y học: Nghiên cứu các đột biến TP53, BRAF trong mô ung thư da và mối liên quan của nó với các thể bệnh

88 trí 105 Glycine thành Apartate (p.G105D). Trong đoạn exon 4, xảy ra 2 vị trí đột biến, trong đó chỉ 1 vị trí đột biến làm thay đổi acid amin đó là vị trí g.13151 Cytosine bị thay thế bằng Thymine, làm cho phân tử protein ở vị trí 158 bị biến đổi acid amin từ Arginin thành Cysteine (p.A158C). Vị trí g.13150 cũng bị thay thế nucleotid Cytosine thành Thymine làm thay đổi bộ ba GTC thành GTT, nhưng không làm thay đổi acid amin vì cả hai bộ ba này đều mã hóa cho Valine. Đoạn exon 6 của gen TP53, có 3 vị trí đột biến, là vị trí g.14049 được thay thế ncleotid Cytosine bằng Thymine, làm cho acid amin biến đổi Senine thành phenylalanine (p.S241F), còn vị trí g.14060 nucleotid Guanine được thay thế bằng Thymine làm biến đổi acid amin ở vị trí 245 thay thế acid amin Glycine thành Cysteine (p.G245C). Tại vị trí g.14062, Cytosine được thay thế bằng Adenine, bộ ba mã hóa GGC chuyển thành GGA, nhưng không làm thay đổi acid amin của phân tử protein vì cả hai bộ ba này đều mã hóa cho acid amin Glycine (p.G245G). Cũng tại exon này, có mẫu đồng thời xảy ra hai đột biến ở vị trí g.14060 và g.14062 của gen dẫn đến thay đổi trên cDNA là c.733G>T và c.735C>A, đột biến này xảy ra tại 1 codon, GGC mã hóa cho acid amin Glycine (G) bị biến đổi thành TGA là mã kết thúc (X). Trường hợp này, sự biến đổi trong phân tử protein là nhiều vì gen sẽ ngắn lại, kết thúc ngay khi xuất hiện đột biến. Nghiên cứu của Forbes S. và cs [107] cũng ở các bệnh nhân ung thư tế bào vảy vùng đầu, cổ thấy các đột biến hay gặp ở gen TP53 dẫn đến thay đổi các acid amin là Arg175His, Glu180Fs, Ser183Stop, Gln52InF, His179Arg, His193Leu, Gly266Arg, và một số đột biến ít gặp khác. Một nghiên cứu khác là của Telmer C. A. và cs [108] cũng tiến hành ở các bệnh nhân ung thư tế bào vảy vùng đầu, cổ thấy các đột biến hay gặp ở gen TP53 làm biến đổi các acid amin ở các vị trí: Arg306Stop, Thr155Pro,

89 His179Tyr, Arg248Gln, Arg175His, Arg273His, Pro151His, Glu224Stop, Arg282Trp, Thr155Pro, Glu294Stop, Arg2880Thr, Ile195Phe, Arg248Gln, His179Asn, Pro177Arg. Cùng nghiên cứu ở một loại bệnh nhân ung thư tế bào vảy vùng đầu, cổ, tuy nhiên các biến đổi mà theo Viros A. và cs, Forbes S. và cs và của Telmer C. A. và cs cho thấy các đột biến trên gen TP53 ở các nghiên cứu của tác giả hầu hết là khác nhau. Trong nhiều đột biến mà các tác giả này đề cập chỉ có đột biến Arg175His là cả 3 tác giả đều cùng phát hiện thấy, đột biến Pro151His thì cả Viros A. và Telmer C. A. cùng phát hiện thấy, các đột biến còn lại chỉ có 1 tác giả đề cập [107],[108],[109]. Năm 2007, Thierry Soussi [110] khi thống kê nhiều báo cáo nghiên cứu về biến đổi gen TP53 ở các bệnh nhân ung thư tế bào vảy vùng đầu, cổ của các tác giả khác nhau, tiến hành nghiên cứu ở các địa điểm khác nhau và thấy 64 loại biến đổi ở gen TP53 đã được phát hiện, tuy nhiên chỉ có 20 biến đổi là có từ 2 nghiên cứu trở lên cùng phát hiện thấy, có tới 44 biến đổi chỉ gặp trong 1 nghiên cứu. Như vậy, biến đổi của gen TP53 rất đa dạng, rất có thể nó những biến đổi phụ thuộc vào chủng tộc người khác nhau và địa dư khác nhau thì có các biến đổi khác nhau. Có lẽ với các lý do trên mà các biến đổi ở gen TP53 trong nghiên cứu của chúng tôi vẫn có một số biến đổi không giống với các tác giả khác. Trong 10 đột biến mà chúng tôi phát hiện thấy ở vùng exon thì có 8 đột biến, 2 đột biến còn lại mặc dù có thay đổi nucleotide nhưng không thay đổi acid amin nên không gây biến đổi ở protein, đây là các đột biến câm lặng. Trong 10 đột biến mà chúng tôi phát hiện thấy ở bệnh nhân ung thư da thì có 6 đột biến là đã được nhiều nghiên cứu trước đó đề cập đến đó là: Đột biến Ser241Phe (p.S241F) và Gly245Cys (p.G245C) ở exon 6. Đột biến p.S241F đã được nhiều tác giả nghiên cứu ở những bệnh nhân ung thư

90 da, ung thư đại trực tràng và một số ung thư khác phát hiện thấy như: Rodrigues N. R.và cs (1990) [111], Weiss J.và cs [112], Kastrinakis W. V.và cs (1995) [113], Rieger K. M.và cs (1995) [114], Van Gele M.và cs (2000) [115]. Đột biến p.G245C đã được các tác giả: Mitsudomi T.và cs (1992) [116], Forbes S. và cs (2006) [107] nghiên cứu ở bệnh nhân ung thư da và các ung thư khác phát hiện thấy. Nghiên cứu của Guiseppina Giglia Mari và Alanin Sarasin (2003) [117] cũng phát hiện thấy đột biến p.G245C của gen TP53 ở những bệnh nhân ung thư da. Đột biến c.472C>T (p.R158C) ở exon 4 cũng đã được đề cập trong bảng danh mục về đột biến trong ung thư [44] của Anh với code Cosm 87549. Đồng thời cũng trong bảng danh mục này biến đổi câm lặng c.471C>T (p.V157V) ở exon 4 do thay thế nucleotid Thymine bằng Cytosine, mã hoang dã là GTC nay đổi thành GTT nhưng acid amin vẫn là Valine, trong nghiên cứu của chúng tôi phát hiện thấy thì trong catalogue cũng đề cập đến là biến đổi có thể có ở bệnh nhân ung thư da với mã số là Cosm44526 [118]. Hai đột biến c.733G>T và c.735C>A, 2 thay đổi nucleotid ở 2 vị trí khác nhau nhưng đều ở một mã khi cùng xuất hiện dẫn đến tạo thành mã kết thúc, đột biến trên phân tử protein là p.G245X, kết quả làm cho gen bị ngắn lại, kết thúc ngay ở nơi xảy ra đột biến. Loại đột biến này xuất hiện ở exon 6 của gen TP53 cũng đã được Guiseppina Giglia Mari và Alanin Sarasin (2003) đề cập trong nghiên cứu ở các bệnh nhân bị ung thư da [117]. Các đột biến gen TP53, làm thay đổi cấu trúc phân tử protein p53, tùy từng điểm đột biến khác nhau, có thể ảnh hưởng đến cấu hình không gian khác nhau của phân tử protein, từ đó ảnh hưởng đến chức năng của phân tử protein [119]. Các nghiên cứu hầu hết chưa chỉ rõ được biến đổi chức năng cụ thể của phân tử protein với các điểm đột biến. Một số nghiên cứu đã tập trung vào từng vị trí đột biến của gen TP53 nhằm tìm hiểu ảnh hưởng của các đột

91 biến đến chức năng của phân tử protein p53 và mối liên quan của các điểm đột biến với các loại ung thư [120], [121]. Nghiên cứu của Dong Z. và đã chỉ ra đột biến gen TP53 ở vị trí codon 72 có liên quan đến đến ung thư đại trực tràng, ung thư biểu mô tế bào vảy [120]. Nghiên cứu của Zampiga V. cho thấy có mối liên quan đột biến gen TP53 ở codon 175 có liên quan đến hội chứng Li – Fraumeni [122]. Mastellaro M.J cũng có kết luận có mối liên quan giữa đột biến gen TP53 tại codon 337 có mối liên quan đến khối u vỏ thượng thận ở trẻ em [121]. Đột biến ở exon 3 c.215C>A dẫn đến thay đổi acid amin ở phân tử protein của p53 là p.P72H mà chúng tôi thấy trong nghiên cứu này cũng đã được nhiều tác giả đề cập như Zafeirious D. I. và cs (2001)... [119] phát hiện khi nghiên cứu ở những bệnh nhi bị ung thư da. Khi tìm ra được mối liên quan của các loại ung thư với từng điểm đột biến, các nhà khoa học có thể tìm được các chất gắn với điểm đột biến nhằm khôi phục chức năng gen TP53, từ đó góp phần vào điều trị bổ trợ ung thư. Như vậy trong 10 đột biến của protein p53 mà chúng tôi phát hiện thấy ở bệnh nhân ung thư da, có 6 đột biến đã được một số tác giả khác đề cập là p. P72H, p.V157V, p.R158C, p.S241F, p.G245C, p.G245G, 4 đột biến còn lại chỉ thấy ở trong nghiên cứu của chúng tôi là p.A63S, p.V73E, p.A74S, p.G105D. Trong 2 đột biến thay thế nucleotid mà không gây biến đổi acid amin của phân tử protein, một đột biến ở exon 4 (c.471C>T: biểu hiện trên protein là p.V157V) và một ở exon 6 c.735C>A (ở protein là p.G245G) thì đột biến ở exon 4 đã được đề cập trong bảng danh mục về đột biến ở bệnh nhân ung thư [118], đột biến ở exon 6 là c.735C>A (biểu hiện trên protein là p.G245G) cũng đã được Guiseppina Giglia Mari và Alanin Sarasin (2003) đề cập trong nghiên cứu ở các bệnh nhân bị ung thư da [117]. Các đột biến p.A63S, p.V73E, p.A74S và p.G105D tuy chưa được các tác giả khác đề cập nhưng khi các đột biến có gây thay đổi acid amin trong

92 phân tử protein thì đều có ảnh hưởng đến kiểu hình phân tử protein của cá thể mang đột biến đó. Tóm lại kết quả nghiên cứu này, chúng tôi phát hiện được 100% bệnh nhân ung thư da có biến đổi gen TP53. Trong đó đột biến ở vùng exon chiếm 27%, biến đổi ở vùng intron chiếm 95,2%, xảy ra cả đột biến vùng exon và biến đổi ở vùng intron là 22,2%. Xác định được 52 loại biến đổi nucleotide trên gen TP53, trong đó có 10 đột biến ở vùng exon và 42 biến đổi ở vùng intron. Trong 10 đột biến ở vùng exon có 5 đột biến ở exon 3, 2 đột biến ở exon 4 và 3 đột biến ở exon 6, các vùng exon 2, exon 5, exon 7, exon 8 và exon 9 không phát hiện có đột biến. 10 đột biến ở vùng exon thì có 6 đột biến đã được nhiều tác giả khác công bố ở các mẫu ung thư da các loại, 4 đột biến chỉ gặp trong nghiên cứu của chúng tôi. Trong các đột biến ở vùng exon, thì có 8 đột biến là thay đổi acid amin của phân tử protein còn 2 đột biến không làm thay đổi acid amin của phân tử protein p53, đây là những đột biến câm lặng. Trong 42 biến đổi ở vùng intron thì ở IVS1 có 6 biến đổi, IVS5 có 1 biến đổi, IVS6 có tới 35 biến đổi, các vùng IVS2, IVS3, IVS4, IVS7 và IVS8 không phát hiện có biến đổi gen TP53. 4.2.2. Về tỷ lệ biến đổi gen TP53 ở trong ung thư da Trong các đoạn gen TP53 đã phân tích ở các mẫu ung thư da, tỷ lệ các mẫu ung thư da có đột biến gen TP53 là 100%, trong đó ở các đoạn exon tỷ lệ đột biến là 27,0%, chủ yếu là các đột biến xảy ra ở exon 3, exon 4 và exon 6. Trong các đột biến này, đoạn hay xảy ra đột biến là exon 3 và exon 6 với tỷ lệ gặp ở các mẫu lần lượt là 25,4% và 12,7%, đoạn exon 4 chỉ gặp 1 mẫu có đột biến ở bệnh nhân ung thư tế bào đáy chiếm 1,6%. Các đoạn exon 2, exon 5 và exon 7 đến 9 không phát hiện thấy đột biến. Biến đổi ở các đoạn intron xảy ra ở hầu hết các mẫu ung thư da chiếm 95,2%, các đoạn có nhiều mẫu biến đổi chủ yếu là IVS1, và IVS6, tỷ lệ biến đổi chung cho các loại ung thư da tương

93 ứng là 85,7%, và 82,5%, đoạn IVS5 có tỷ lệ biến đổi tỷ lệ biến đổi thấp nhất là 1,6%. Các đoạn IVS2, IVS3, IVS4 và IVS7, IVS8 không thấy có biến đổi. Biến đổi phối hợp các đoạn exon và intron của gen TP53 chiếm tỷ lệ 22,2%. Theo Viros A. [109], các đột biến gen TP53 gặp ở bệnh nhân ung thư da có (His39Tyr, Ser124Phe, Arg245Cis, Arg270Cis, Cis272Gly) với tần số 40%. Burns J. E. và cs [121] nghiên cứu ở các bệnh nhân ung thư tế bào vảy vùng đầu, cổ thấy các đột biến hay gặp là Trp146X, Ile332InF, Leu308Fs, Arg282Pro, Val173InF, Tyr126InF, Gln192Stop, Pro151His, Val216Gly, Glu258Lys, Glu224Fs, Arg209Fs, Arg175His, Pro151Ser, và nhiều đột biến khác nữa ít gặp hơn. 4.2.3. Biến đổi gen TP53 ở trong từng loại ung thư da Ở các mẫu ung thư tế bào đáy, các biến đổi gen TP53 gặp ở 6 đoạn IVS1, Exon3, exon4, IVS5, exon6 và IVS6, các biến đổi tập trung ở các đoạn IVS1, exon 3, IVS6 và exon 6 với tỷ lệ lần lượt là 57,1%, 61,9%, 71,4%, và 38,1% . Biến đổi xảy ra ở vùng IVS5 và exon 6 chỉ gặp ở 1 mẫu và đều chiếm tỷ lệ 1,6%. Đối với mẫu ung thư tế bào vảy, biến đổi gen TP53 xảy ra ở 3 đoạn IVS1, exon3 và IVS6, trong đó đoạn IVS1 có biến đổi xảy ra ở tất cả các mẫu ung thư tế bào vảy, đoạn IVS6 cũng có tỷ lệ biến đổi cao là 76,2% và biến đổi ở đoạn exon 3 có tỷ lệ 14,3%, các đoạn còn lại không phát hiện thấy có biến đổi. Đối với ung thư tế bào hắc tố, biến đổi chỉ xảy ra ở 2 đoạn là IVS1, IVS6 và xảy ra ở tất cả các mẫu, chiếm tỷ lệ 100%. Nếu chỉ đề cập đến các biến đổi là các đột biến ở exon thì với ung thư tế bào đáy, tỷ lệ mẫu có đột biến ở exon 3 đã là 61,9%, ở exon 6 là 38,1%, ở exon 4 là 4,8%. Trong khi đó ung thư tế bào vảy chỉ có 14,3% mẫu có đột biến ở exon 3, không phát hiện thấy mẫu nào có đột biến ở exon 4 và exon 6. Với ung thư tế bào hắc tố thì chỉ thấy những biến đổi ở intron, không thấy những đột biến ở exon.

94 Biến đổi gen TP53 gặp chủ yếu ở ung thư tế bào đáy, cũng đã được nhiều tác giả đề cập [96],[98],[101],[102],[103]. Với các nghiên cứu của các tác giả này cho thấy đột biến ở vùng exon 3 trên gen TP53 gặp với tỷ lệ 71,1% số mẫu, trong đó loại đột biến g.12139C>G (c.215C>G) chiếm tỷ lệ chủ yếu, có tới 51,3% các mẫu ung thư tế bào đáy bị đột biến ở dạng này. Với exon 4 chúng tôi phát hiện có 1 mẫu có đột biến ở exon 4, ở mẫu này đột biến ở cả 2 vị trí, tuy nhiên ở trạng thái dị hợp tử. Hai vị trí đột biến sát nhau trên gen là g.13150C>T và g.13151C>T, nhưng thuộc hai bộ ba mã hóa hai acid amin khác nhau. Tuy nhiên, loại đột biến ở vị trí g.13150C>T thì không gây thay đổi acid amin trên phân tử protein, đây là các đột biến câm lặng. Đột biến ở exon 6 chỉ xuất hiện ở các mẫu ung thư tế bào đáy. Không thấy đột biến exon 6 đối với các mẫu ung thư tế bào vảy và ung thư tế bào hắc tố. Các đột biến exon 6 của các mẫu ung thư tế bào đáy đều là đột biến hoàn toàn, các đột biến này gây thay đổi trình tự mã hóa các acid amin. Có 7 mẫu bị đột biến đồng thời ở cả hai vị trí g.14060G>T và g.14062C>A, hai vị trí này trên exon 6 liên quan đến 1 bộ ba mã hóa 1 acid amin là Glycine (GGC), khi đồng thời hai đột biến xảy ra, bộ ba mã này bị đổi thành TGA, chuyển thành mã kết thúc. Trong các biến đổi ở các đoạn gen TP53, có một biến đổi xảy ra ở nhiều mẫu và có nhiều mẫu cùng bị một biến đổi. Bên cạnh các biến đổi ở trên các vùng có sao mã exon, chúng tôi cũng gặp nhiều biến đổi ở các vùng intron. Các biến đổi ở vùng intron hầu hết là không gây hậu quả gì. Tuy nhiên có rất ít các trường hợp biến đổi ở vùng intron nhưng lại làm cho vùng không mã hóa này có thể mã hóa và biến đổi này cũng gây nên các biểu hiện khác thường. Một bệnh nhân có thể có nhiều biến đổi xảy ra, loại biến đổi kết hợp

95 hay gặp nhất là biến đổi IVS1 và IVS6, đây cũng là 2 đoạn của gen có tỷ lệ biến đổi cao, loại biến đổi phối hợp này gặp ở cả ung thư tế bào đáy, tế bào vảy và ung thư tế bào hắc tố. Biến đổi phối hợp ở IVS1 và IVS6 là biến đổi hay gặp cũng được một số tác giả khác đề cập [96],[102],[103]. Loại biến đổi hay gặp tiếp theo là biến đổi IVS1 và IVS6 và exon 3. Các loại biến đổi phối hợp khác gặp với tỷ lệ ít. Tuy nhiên, hầu hết các mẫu ung thư da các loại đều có từ 2 biến đổi trở lên, thậm chí có mẫu biến đổi tới 19 vị trí trên gen TP53. Các biến đổi phối hợp có thể ở 1 vùng nào đó trên gen TP53, nhưng cũng có thể đồng thời xuất hiện ở nhiều vùng khác nhau. Nhiều nghiên cứu đã đề cập đến sự phối hợp của các biến đổi gen TP53 trong ung thư như Ye X. H. và cs (2014) cho thấy sự tích lũy các biến đổi gen TP53 ở codon 72, phối hợp với biến đổi ở các đoạn intron 3 và intron 6, làm tăng nguy cơ ung thư [124]. 4.2.4. Phân tích biểu lộ protein p53 đột biến trong mô ung thư da Trong nghiên cứu này, chúng tôi sử dụng đồng thời hai phương pháp là giải trình tự gen để xác định đột biến gen TP53 và nhuộm hóa mô miễn dịch để phát hiện protein p53 đột biến trong mô ung thư da. Bình thường, protein p53 có đời sống bán hủy ngắn và không phát hiện được bằng phương pháp hóa mô miễn dịch, nhưng khi gen này bị đột biến sẽ có đời sống bán hủy kéo dài hơn và có thể phát hiện được bằng hóa mô miễn dịch. Chính vì vậy, các nhà sản suất đã cho ra hai loại chế phẩm là xác định biểu lộ protein p53 và protein p53 đột biến trong mô ung thư. Chúng tôi đã chọn phương pháp xác định protein p53 đột biến trong mô ung thư da để có kết quả so sánh với kết quả đột biến gen TP53. Từ đó có thể rút ra được sự tương đồng và khác biệt cũng như kết quả của hai phương pháp giúp đưa ra gợi ý cho các nhà lâm sàng về việc sử dụng kỹ thuật nào để xác định đột biến gen TP53 trong mô ung thư.

96 Nghiên cứu này chúng tôi tiến hành nhuộm hóa mô miễn dịch với 63 mẫu ung thư da gồm 3 loại là ung thư tế bào đáy, ung thư tế bào vảy và ung thư tế bào hắc tố (mỗi loại 21 mẫu) để phát hiện sự biểu lộ protein p53 đột biến. Kết quả thu được có 17 mẫu có kết quả dương tính chiếm 27,0% tổng số mẫu ung thư da. Trong đó tỷ lệ biểu lộ protein p53 đột biến ở loại ung thư tế bào đáy là cao nhất (chiếm 66,7% trong số bệnh nhân ung thư da loại tế bào đáy) và chiếm 14,3% trong ung thư tế bào vảy. Ở ung thư tế bào hắc tố không thấy có biểu lộ protein p53 đột biến. Một điều thú vị là những mẫu có đột biến gen TP53 ở các đoạn exon thì chúng tôi đều thấy có biểu lộ protein p53 đột biến ở mô ung thư da. Những mẫu không có đột biến ở các exon, mà có biến đổi ở các đoạn intron thì đều không thấy biểu lộ protein p53 đột biến trong mô ung thư da. Trong số các đột biến ở đoạn exon, có 2 biến đổi không làm thay đổi acid amin, nhưng các biến đổi này lại kết hợp với các biến đổi ở vị trí khác nên kết quả mẫu đó vẫn dương tính với protein p53 đột biến. Điều này cho thấy có sự phù hợp về mặt chức năng của các đoạn gen khi tham gia vào quá trình tổng hợp protein, chỉ những đoạn exon mới tham gia làm khuôn mẫu để tổng hợp phân tử protein, những đoạn intron không tham gia làm khuôn mẫu để tổng hợp protein nên khi có biến đổi ở đoạn intron sẽ không gây nên sự thay đổi trình tự acid amin trên phân tử protein. Chính vì vậy những biến đổi intron được xác định bằng phương pháp giải trình tự gen mà không có biến đổi ở đoạn exon thì cũng không có biểu lộ protein đột biến trong mô ung thư da. Kết quả của chúng tôi cũng tương tự như kết quả của Lê Đức Minh [16] nghiên cứu biểu lộ protein p53 đột biến trong mô 131 bệnh nhân ung thư da loại tế bào đáy cho thấy tỷ lệ dương tính là 24,4%. Một số tác giả nghiên cứu sự biểu lộ protein p53 đột biến trong mô ung thư khác như kết quả nghiên cứu của Tạ Văn Tờ cho thấy tỷ lệ protein p53 đột biến dương tính trong mô

97 ung thư biểu mô tuyến vú là 42,1% (n=95) và sự biểu lộ này tăng dần theo độ mô học. Việc tìm hiểu mối liên quan giữa đột biến gen TP53 và sự biểu lộ protein p53 đột biến trong mô ung thư là cần thiết, kết quả này sẽ giúp các nhà lâm sàng có thể lựa chọn kỹ thuật giải trình tự gen để xác định đột biến gen TP53 hay bằng kỹ thuật đơn giản hơn. Đó là kỹ thuật xác định sự biểu lộ protein p53 đột biến bằng phương pháp hóa mô miễn dịch, đây cũng là xét nghiệm dễ làm hơn, giá thành thấp hơn và cho phép phát hiện sự tích luỹ bất thường của protein p53 trong tế bào ung thư. Trên thế giới nghiên cứu đột biến gen TP53 và sự biểu lộ protein p53 trong mô ung thư da cũng đã được nhiều tác giả thực hiện trên nhiều đối tượng khác nhau. Venza M. và cs cho rằng sự biểu lộ protein p53 ở bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào vảy là 46,7% và không có sự khác biệt giữa ung thư da nguyên phát và ung thư da tái phát có di căn [125]. Bukhari M. H. và cs xác định đột biến gen TP53 và biểu lộ protein p53 đột biến ở 140 mẫu mô sinh thiết da cho thấy cả hai dấu hiệu trên đều không phát hiện được trên da bình thường, nhưng trong ung thư tế bào đáy là 70% và trong ung thư tế bào vảy là 96,25% và đột biến gen TP53 có liên quan đến sự biểu lộ protein đột biến [126]. Điều này cũng phù hợp với nghiên cứu của Mlmquist L. M. và cs cho thấy có mối liên quan giữa đột biến gen TP53 và sự biểu lộ protein p53 đột biến trong mô ung thư da [127]. Như vậy protein p53 là một yếu tố quan trọng trong theo dõi, tiên lượng ung thư da. Những trường hợp đột biến gen TP53 thường có đáp ứng kém với điều trị hoá chất, do đó xác định tình trạng biểu lộ protein này được dùng để lựa chọn phương pháp điều trị bổ trợ thích hợp trong ung thư da. Đột biến gen TP53 là biến đổi di truyền hay gặp trong nhiều loại ung thư ở người, đặc biệt là các loại ung thư như: ung thư da, phổi, vú và đại tràng... Các đột biến hầu hết là đột biến điểm trong đoạn exon 2 đến 9, kết quả